质粒介导16S rRNA甲基化酶肺炎克雷伯菌临床分离株的检测及分子流行病学研究＝Molecular epidemiology and detection of clinical isolates of Klebsiella pneumoniae producing plasmid-mediated 16S rRNA methylases［刊，中］／余方友1，陈婵2，杜卫良2，李国安2，张雪青1，陈增强1，陈坚1，王良兴12，朱涛3，瞿涤3(1. 温州医学院附属第一医院检验科，温州325000；2.温州医学院附属第一医院呼吸科，温州325000；3. 复旦大学上海医学院教育部 卫生部医学分子病毒学重点实验室，上海200032)//中华检验医学杂志. －2009，32(3).－268～273

     目的  调查16S rRNA甲基化酶在肺炎克雷伯菌临床分离株中的流行情况。方法  收集我院2006年1月至2007年9月从临床标本中分离的肺炎克雷伯菌337株，所有菌株均为非重复株。菌种鉴定采用全自动微生物分析仪，庆大霉素、阿米卡星和妥布霉素的药敏试验采用琼脂稀释法。超广谱β内酰胺酶（ESBLs）检测采用美国临床和实验室标准协会（CLSI）规定的纸片确证法。使用PCR检测16S rRNA甲基化酶基因、整合酶基因和ESBL基因。接合试验检测质粒的可转移性；脉冲场电泳分析菌株的同源性。结果  337株肺炎克雷伯菌对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星的耐药率分别为19.0%（64/337）、8.3%（28/337）和16.3%(55/337)。21株16S rRNA甲基化酶基因阳性，阳性率为6.2%(21/337)，其中13株rmtB阳性、3株armA阳性、5株rmtB和armA同时阳性。所有16S rRNA甲基化酶基因阳性株对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星同时耐药且都为高度耐药（MICs≥256 μg/L）， 21株甲基化酶基因阳性株有19株产ESBLs， ESBL基因主要为CTX-M-14-like、 CTX-M-15-like和SHV-12-like。21株均为Ⅰ类整合酶基因阳性。13株通过接合试验把质粒传递给受体菌E.coli J53。所有接合子Ⅰ类整合酶基因阳性、blaTEM-1基因阳性、产ESBLs及对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星和复方磺胺甲NFDC2唑耐药，对其他抗菌药物敏感。接合子ESBL基因型与供菌一致。21株16S rRNA甲基化酶基因阳性株经脉冲场凝胶电泳（PFGE）分成14个基因型，主要为A型和Ⅰ型。结论  armA和rmtB型16S rRNA甲基化酶基因已经在肺炎克雷伯菌中播散，既可通过克隆株播散也可通过接合性质粒在不同菌株间播散。

图0表2参17（武昱）关键词：克雷伯菌, 肺炎；RNA, 核糖体, 16S；甲基转移酶类；质粒

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