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论著
胆固醇和甘油环糊精水溶液标准物质的研制
中华检验医学杂志, 2017,40(07): 520-525. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2017.07.010
摘要
目的

研制胆固醇和甘油水溶液基质的标准物质。

方法

标准物质研究。以胆固醇标准物质GBW09203b和甘油标准物质GBW09149为原料,溶解到20%甲基环糊精溶液中,称量配制法制备6个浓度水平的候选标准物质。用常规方法进行均匀性和同步稳定性研究。用参考方法—同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)测定候选标准物质以评价定值的准确性,同时进行空白验证试验。评价不均匀性、不稳定性和定值引入的不确定度,并计算总不确定度。

结果

6个浓度水平标准物质的研究结果显示均匀性良好,在-70 ℃和-20 ℃保存至少可稳定1年。定值结果("标准值±扩展不确定度",单位:mmol/L)如下,胆固醇:0.65±0.01,1.31 ±0.01,2.57±0.02,5.21±0.06,7.71±0.08,10.24±0.06;甘油:0.29±0.01,0.58±0.01,1.22±0.02,2.24±0.02,3.46±0.04,4.52 ±0.04。参考方法测定结果与定值结果一致。空白验证结果显示试剂、空白基质不会对待测物的浓度产生影响。

结论

成功研制了胆固醇和甘油水溶液基质的候选标准物质。物质均匀、稳定,定值可靠,已被批准为国家一级标准物质(GBW 09823、GBW 09824、GBW 09825、GBW09826、GBW09827和GBW 09828)。(中华检验医学杂志,2017, 40:520-525)

引用本文: 周伟燕, 禹松林, 曾洁, 等.  胆固醇和甘油环糊精水溶液标准物质的研制 [J]. 中华检验医学杂志,2017,40( 7 ): 520-525. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2017.07.010
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建立完善的临床检验量值溯源体系,首先要建立参考(标准)系统(包括参考测定程序和标准物质)。制备不同级别的标准物质是实现实验室间结果互认的基础,尤其是纯度标准物质作为量值溯源的源头,在量值传递过程中发挥着举足轻重的作用。国际上已经有相应的胆固醇纯度标准物质和血清标准物质[1]。国内也有相应的标准物质(胆固醇纯度标准物质GBW09203b和甘油标准物质GBW09149)、血清标物等。由于胆固醇不溶于水,在参考方法或常规测定中,通常将胆固醇溶于甲醇或乙醇中,以用作校准物或质控物,由于甲醇或乙醇挥发性较大,体积随温度变化较大,且基质同实际临床样本差距较大,容易引起测定结果的偏差。甘油极易溶于水,通常直接配制水溶液。目前尚没有商品化的含胆固醇和甘油两种项目的水溶液。

本研究按照ISO Guide 35[2]和国家一级标准物质技术规范(JJG 1006-1994)[3]的要求,以水溶液作为基质,配制了6个浓度水平的标准溶液,包含胆固醇和甘油两个项目,分别称为RM1~RM6。本标准物质主要用于参考系统的校准或准确性评定,也可用于具有互通性的常规系统中。

材料与方法
一、实验材料

胆固醇纯度标准物质GBW09203b(白色粉末,卫生部北京老年医学研究所和国家标准物质研究中心,纯度99.7%,不确定度0.1%)。甘油标准物质GBW09149(卫生部北京老年医学研究所,定值0.103 6±0.000 4 g/g),此物质为纯度99.9 %的甘油(Sigma公司,G-7893,Lot 96H0568)的水溶液,经滴定法定值。叠氮钠为白色粉末,纯度大于等于99.5%,Sigma公司产品。甲基-β-环糊精购自淄博千汇生物科技有限公司,纯度大于等于98%。

二、标准物质的制备
1.胆固醇标准物质的干燥:

GBW09203b放入玻璃平皿中铺开,真空干燥箱50 ℃减压干燥10 h。

2.0.05%叠氮钠的配制:

称取1 g叠氮钠加去离子水至2 L,混匀,得到浓度为0.05%的叠氮钠溶液。

3.20%甲基-β-环糊精(MBCD)水溶液的配制:

称取400 g MBCD加入到2 L容量瓶中,加入1 000 g含0.05%的叠氮钠溶液,搅拌均匀后再加入600 g 0.05%叠氮钠溶液,使MBCD的终浓度约为20%(g/g),混匀后经0.45 μm滤膜过滤,收取滤液作为所配制标准物质的溶剂。配制之前进行色谱质谱分析,检测不到胆固醇和甘油方可使用。

4.胆固醇和甘油环糊精标准溶液的配制:

配制6个浓度水平的胆固醇和甘油标准溶液,其对应的胆固醇浓度分别为25、50、100、200、300、400 mg/dl(换算物质的量浓度为0.647、1.293、2.586、5.172、7.758和10.344 mmol/L),甘油浓度分别为25、50、100、200、300、400 mg/dl(浓度约为0.282、0.565、1.129、2.259、3.388和4.517 mmol/L)。每个水平250 ml,分别命名为RM1~RM6。准确称取约60.6、123、235、475、720和950 mg的胆固醇标准物质GBW09203b和甘油标准物质GBW09149置于可密封的250 ml具盖容器中,分别向各容器中加入20%的MBCD滤液250 g。标准物质用十万分之一天平称量,MBCD溶液用千分之一天平称量。记录加入的GBW09203b、GBW09149和MBCD溶液的准确质量。

5.混合、分装、保存:

将各配制好的标准溶液放置于混匀器上混匀后,按0.8 ml/支分装至2 ml玻璃容器中,RM1~RM6各分装270支玻璃安瓿。-70 ℃保存。

三、均匀性和稳定性检验
1.实验设计:

按GB/T15000.3-2008 /ISO Guide35:2006《标准物质/标准样品定值的一般原则和统计方法》[2]和国家一级标准物质技术规范[3]要求进行均匀性和稳定性检验的设计和实验。本项目随机抽取-70 ℃保存的RM1~RM6各12瓶进行均匀性检验。采用同步稳定性研究[4]进行稳定性检验,共设计13种"温时",以液氮(-196 ℃)作为参比温度和0时间点,-70 ℃和-20 ℃储存3、6、12个月,4 ℃储存0.5、1、2个月,25 ℃储存0.25、0.5、1个月与0点比较。储存于不同温度和不同时间的样品在到期时抽取3瓶转移至液氮中,-20 ℃、4 ℃和25 ℃放置的样品先在-70 ℃冰箱放置过夜再转至液氮中。至稳定性试验12个月结束时将前述所有样品同时从液氮中一并取出,融化、混匀后同时分析所有样本。

2.仪器和试剂:

采用日立7180全自动生化分析仪和罗氏试剂及配套校准品和质控品组成的测定系统进行分析。使用罗氏厂家推荐的分析参数。胆固醇和甘油的测定原理分别为胆固醇氧化酶法和GPO-POD法。

3.实验方法:

进行均匀性、稳定性分析,将均匀性测定结果采用单因素方差分析进行检验,将各温时下稳定性测定结果与时间进行线性回归分析和趋势性检验,检验回归系数的显著性,以P>0.05认为不具有显著性,即可认为稳定。评估不均匀性和不稳定性带来的不确定度。

四、定值和不确定度分析
1.定值方法:

采用称量配制定值,关键测量设备即天平,Cubis®MSA125P-100-DI十万分之一天平和Sartorius BSA 623S-CW千分之一天平。在称量之前用标准砝码对天平进行方法确认。

2.定值过程:

分别用万分之一天平准确称取约61~950 mg预先烘干的胆固醇标准物质GBW09203b和61~950 mg甘油标准物质GBW09149置于可密封的250 ml具盖容器中,向容器中加入20%的MBCD滤液250 g,用千分之一天平准确称取加入的MBCD的质量。记录GBW09203b、GBW09149和MBCD溶液的准确质量。各溶液配制的详细数据见表1

表1

标准物质的称量数据

表1

标准物质的称量数据

名称目标浓度(mg/dl)GBW09203b(m1)(g)GBW09149(m2)(g)MBCD(m3)(g)密度(ρ) (mg/ml)
RM 1250.060 730.061 11255.4091.062 68
RM 2500.120 610.122 07251.8051.061 72
RM 31000.235 350.256 17250.0071.062 68
RM 42000.477 220.471 02250.0111.062 54
RM 53000.709 900.729 96250.3051.060 33
RM 64000.941 760.953 14250.0171.062 49
3.密度测量:

使用密度仪对各溶液的密度进行测定,环境温度20 ℃。将RM1~RM6置室温下(环境温度20 ℃)平衡1 h,缓缓摇匀,然后开封进行测定。每份样本测定3次,取平均值为测定值。详细数据见表1

4.不确定度分析:

主要包括不均匀性对不确定度的贡献ubb、不稳定性对不确定度的贡献和定值测量不确定度uchar。其中各标准物质中胆固醇和甘油定值测量不确定度评估方式相似,即将原料引入uc(P)、称量引入uc(m)和密度测定引入uc(ρ)的三种相对不确定度进行合成得到定值测量的相对不确定度uchar。不稳定性对不确定度的贡献主要包括长期不稳定性引入的不确定度ults和短期不稳定性的不确定度usts。短期不稳定性主要考虑样本通过运输到达使用者的时间内带来的不稳定性,由于我们选定的运输条件为干冰运输,运输时间约为2天,干冰运输的温度一般为-40 ℃左右。由各时间点的变化率计算得到-20 ℃下该物质中甘油和胆固醇每天变化率小于0.02%,干冰运输的温度条件下变化率更小,因此运输(短期)中甘油和胆固醇不稳定性造成的不确定度可以忽略,认为usts为0。按照ISO Guide35的公式计算各项不确定度,并合成总不确定度uCRM

5.统计学分析:

数据通过EXCEL 2007和SPSS 17.0软件分析,以P<0.05认为具有统计学意义。认定值的表达方式为:标准值(mmol/L)±扩展不确定度(U,mmol/L),扩展因子k=2。

五、参考方法验证和空白验证
1.参考方法验证:

采用参考方法对配制浓度进行验证。胆固醇和甘油均采用同位素稀释液相色谱串联质谱法[5,6,7]进行测定,其中胆固醇的测定方法已列入JCTLM列表。

2.空白验证:

验证试剂、包装材料对标准物质浓度的影响。分别配制20%甲基-β-环糊精(MBCD)溶液(于包装材料中)、200 mg/dl甘油的MBCD溶液、200 mg/dl胆固醇的MBCD溶液、200 mg/dl甘油和胆固醇的MBCD溶液。将以上四种溶液分别按照参考方法的要求进行样品制备,并进行质谱分析。

结果
一、均匀性检验

经检验,RM1~RM6中胆固醇和甘油的均匀性原始数据均符合正态分布,采用单因素方差分析评价均匀性,得到的胆固醇的P值分别为0.44、0.41、0.24、0.01、0.09和0.41,甘油的P值分别为0.19、0.41、0.16、0.13、0.11和0.72。除RM4中的胆固醇之外其他P值均大于0.05,说明这几种物质中的胆固醇和甘油均匀性良好。RM4中的胆固醇的均匀性检验结果的显著性水平P=0.01,重新抽取12瓶RM4样本进行均匀性实验,得到P=0.11,鉴于这种结果我们认为RM4中的胆固醇是均匀的,并且将第一次均匀性分析得到的较大的不确定度计算入总不确定度之中。

二、稳定性检验

本研究各温时下的数据均可采用线性回归模型进行分析。统计结果显示:在-70 ℃和-20 ℃下,P>0.05,即均不存在显著性差异,表明此标准物质中胆固醇可在-70 ℃和-20 ℃稳定12个月,其他温时下方差分析的P<0.05,说明此标准物质中的胆固醇在4 ℃下储存2个月和室温下保存1个月均是不稳定的。

将各温时下贮存的样本测定值与参比值(0时间点)进行比较,计算出不同温度下各贮存时间点胆固醇浓度的变化率,结果见下表2。由结果可知,此标准物质中在-70 ℃和-20 ℃储存12个月胆固醇浓度变化小于-0.5%,4 ℃储存2个月胆固醇浓度下降约1.74%,室温保存1个月胆固醇浓度下降约1.64%。室温保存7 d浓度下降1.58%后趋于稳定。在-70 ℃和-20 ℃储存12个月甘油浓度变化小于-0.7%,4 ℃储存2个月甘油浓度下降约3.36%,室温保存1个月甘油浓度下降约3.50%。室温保存7天浓度下降3.50%后趋于稳定。

表2

胆固醇在不同温时下贮存测定值与参比值的变化率(%)

表2

胆固醇在不同温时下贮存测定值与参比值的变化率(%)

贮存温度(℃)测量物质贮存时间
0(月)0.25(月)0.5(月)1(月)2(月)3(月)6(月)12(月)
-70胆固醇0.00-0.08-0.37-0.11
 甘油0.00-0.67-0.31-0.25
-20胆固醇0.00-0.04-0.13-0.21
 甘油0.00-0.50-0.55-0.53
4胆固醇0.00-1.15-1.35-1.74
 甘油0.00-2.05-2.66-3.36
25胆固醇0.00-1.58-1.50-1.64
 甘油0.00-3.50-3.33-3.30

注:-表示无数据

此候选标准物质于2014年9月份配制,2014年9月和2015年9月分别用参考方法对这批物质的胆固醇和甘油进行了测定,两次测定结果显示胆固醇的的偏差为-0.69%~0.87%,甘油的偏差为-0.83%~0.70%,见表3。根据CNAS-GL03:2006(能力验证样品均匀性和稳定性评价指南)[8],胆固醇和甘油的二分之一允许总误差的0.3倍分别为1.35和2.1,本测定结果的偏差均在允许的范围内。将两组数据分别进行独立样本t检验,得到的P值分别为0.69和0.34,均大于0.05。结果表明标准物质在-70 ℃保存可稳定一年。

表3

参考方法测定值与称量配制定值结果的比较

表3

参考方法测定值与称量配制定值结果的比较

物质胆固醇甘油
参考方法(mmol/L)称量配制(mmol/L)偏差(%)参考方法(mmol/L)称量配制(mmol/L)偏差(%)
RM125.4025.180.8725.2225.32-0.39
RM250.9550.650.5850.8751.22-0.68
RM3100.3399.540.80109.01108.250.70
RM4202.13201.440.34199.57198.650.46
RM5296.05298.11-0.69303.71306.25-0.83
RM6397.30396.010.32397.49400.45-0.74
三、定值结果和不确定度评估
1.定值数据处理:

胆固醇和甘油的标准值为单个实验室采用称量配制定值,得到标准物质的质量浓度(mg/g),再通过密度计测量各物质的密度,从而计算出标准物质的体积浓度(mg/dl)和物质的量浓度(mmol/L)。

使用的胆固醇原料一级标准物质为纯品粉末(纯度99.7%,不确定度0.1%),因此加到溶液中的胆固醇的量m0就等于GBW09203b的质量(m1)×纯度。甘油一级标准物质GBW09149为溶液,浓度为0.103 6±0.000 4 g/g,计算得相当于三酰甘油浓度为:C=0.103 6*MW三酰甘油/MW甘油=0.103 6×885.45/92.09=0.996 1 g/g,因此加到溶液中的相当于三酰甘油质量m4=GBW09149的质量(m2)×C。然后将质量浓度(mg/g)分别除以密度ρ(mg/ml)计算得到体积浓度(mg/dl):C3=C1/ρ×100和C4=C2 /ρ×100。计算数据见表4

表4

标准物质的浓度计算数据

表4

标准物质的浓度计算数据

名称胆固醇(g)甘油(g)溶液(g)胆固醇质量浓度(mg/g)甘油质量浓度(mg/g)胆固醇体积浓度(mg/dl)甘油体积浓度(mg/dl)
RM10.060 550.060 87255.530.236 950.238 2225.1825.32
RM20.120 250.121 60252.050.477 090.482 4350.6551.22
RM30.234 640.255 18250.500.936 711.018 6799.54108.25
RM40.475 790.469 19250.961.895 881.869 59201.44198.65
RM50.707 770.727 13251.742.811 462.888 35298.11306.26
RM60.938 930.949 44251.913.727 233.768 94396.01400.45
2.不确定度评估:

通过合成定值测量、均匀性和稳定性对样本不确定度的贡献来评估样本的标准不确定度uCRM。取扩展因子k=2,计算扩展不确定度U和相对扩展不确定度Urel,评估结果见表5

表5

标准物质的认定值和不确定度

表5

标准物质的认定值和不确定度

测定项目样品认定值(mmol/L)相对不确定度分量(%)总不确定度相对
ucultsubbuCRM(%)扩展U(%)扩展U(mmol/L)
胆固醇        
 RM10.6510.059 30.246 40.140 90.290.580.004
 RM21.3100.052 60.246 40.108 50.270.550.007
 RM32.5740.051 10.246 40.134 30.290.570.015
 RM45.2100.050 40.246 40.465 10.531.060.055
 RM57.7100.050 20.246 40.391 20.470.930.072
 RM610.2420.050 20.246 40.110 10.270.550.056
甘油        
 RM10.2860.195 70.326 70.633 70.741.480.004
 RM20.5780.193 70.326 70.158 60.410.820.005
 RM31.2230.193 30.326 70.304 80.490.970.012
 RM42.2440.193 10.326 70.242 60.450.900.020
 RM53.4590.193 10.326 70.251 60.460.910.031
 RM64.5230.193 10.326 70.184 70.420.840.038
3.结果表达:

认定值的表达方式为:标准值(mmol/L)±扩展不确定度(mmol/L,U),扩展因子取值为2,标准物质RM1~RM6的定值结果为如下,胆固醇:0.65±0.01,1.31±0.01,2.57±0.02,5.21±0.06,7.71±0.08,10.24±0.06;甘油:0.29±0.01,0.58±0.01,1.22±0.02,2.24±0.02,3.46±0.04,4.52±0.04。

四、参考方法验证和空白验证

胆固醇和甘油均采用同位素稀释液相色谱串联质谱法进行参考方法验证。测定结果显示胆固醇的测定值与配制值的偏差为-0.69%~0.87%,甘油的测定值与配制值的偏差为-0.85%~1.27%。将胆固醇和甘油各参考方法得到的峰面积比值与配制浓度进行线性回归分析,得到的线性回归方程的线性相关系数分别为0.999 98和0.999 93。

为验证试剂、包装材料对标准物质浓度的影响特进行了空白验证试验。20%甲基-β-环糊精(MBCD)溶液(于包装材料中)、200 mg/dl甘油的MBCD溶液、200 mg/dl胆固醇的MBCD溶液、200 mg/dl甘油和胆固醇的MBCD溶液,将以上四种溶液分别按照参考方法的要求进行样品制备,并进行质谱分析。测定结果显示包装材料、环糊精溶液、甘油的环糊精溶液在胆固醇的检测条件下均未检出,都不会对胆固醇的浓度带来影响;包装材料、环糊精溶液、胆固醇的环糊精溶液在甘油的检测条件下均未检出,都不会对甘油的浓度带来影响。

讨论

研制不同级别的标准物质是实现实验室间结果互认的基础,尤其是作为校准物质使用的纯度标准物质。目前国际上已经有相应的胆固醇纯度标准物质和血清标准物质。其中胆固醇纯度标准物质均为纯品粉末,由于胆固醇几乎不溶于水(常温下水中溶解度为0.002 mg/ml),所以目前常用的胆固醇纯度校准溶液主要以有机溶剂(如氯仿、异丙醇、乙醇等)或含有大量表面活性剂的水为溶剂。在胆固醇参考测量中常将胆固醇溶于乙醇中,制备校准溶液。有机溶剂溶解的胆固醇校准溶液具有很多缺点,其中最主要的就是有机溶剂易挥发,受温度、季节等外界因素的影响较大。温度改变5 ℃,容量法移取乙醇将会产生约0.4%的误差[5]。其次,由于乙醇和血清的基质明显不同,在取样或样本制备中可能会产生基质误差。若能使用水溶液基质的胆固醇校准溶液,将大大方便临床实验室应用。国际上用作三酰甘油校准的纯度标准物质主要是美国国家标准和技术研究院(NIST)的SRM1595(三软脂酸甘油酯),此物质为油性液体,制备校准溶液时需溶于有机溶剂中,测定中同样存在类似胆固醇的问题。临床上测定三酰甘油通常测定的是总甘油,也有去游离甘油法,因此更常见的校准物是甘油水溶液。

稳定性研究通过常规酶法测定完成,采用同步稳定性实验设计。结果显示胆固醇和甘油标准物质可在-70 ℃和-20 ℃稳定12个月。4 ℃储存2个月内,胆固醇和甘油均随时间逐渐下降。室温保存1周胆固醇浓度下降约1.6%,一个月后仍为1.6%。甘油室温保存1周浓度下降约3.50%,1个月后为3.30%。这个结果说明标准物质在室温保存时,胆固醇浓度降低约1.6%,甘油降低约3.3%,浓度降低后至少在1个月的研究周期内趋于稳定。标准物质应保存于-70 ℃或-20 ℃,使用时直接放至室温平衡,4 ℃保存时可看到有白色物质析出,可能是在4 ℃下环糊精溶液对胆固醇和甘油的溶解能力下降导致溶质析出。因此此标准物质不能置于4 ℃保存。

互通性是临床检验标准物质的重要属性[9]。通常这种非血清基质的标准物质在常规系统上的互通性都不理想[10,11]。结果显示对于胆固醇项目,RM1~RM6在大多数系统上具有互通性,其中RM1~RM3只对个别系统(n<5)不具有互通性。15种系统测定血清样本和标准物质的变异系数(n=3)CV均小于1%,即不精密度很小,这样标准物质微小的基质效应也很容易被检测出来。由基质偏差表和基质效应图可知,RM1~RM6在和光、迈瑞、九强、罗氏和长征系统的基质偏差与允许偏差相比,差距很小,小于靶值的1%,几乎不具有临床意义。只有RM4~RM6在Thermo和德赛系统上表现很小的正基质效应,在迪瑞系统上表现负基质效应,胆固醇标准物质在其他系统上的基质效应很小,可以正常使用。对于三酰甘油/总甘油项目,RM1~RM6在大多数系统上都不具有互通性,其中由于和光、协和、积水的常规测定系统采用去游离甘油法,而本标准物质即为甘油水溶液,在测定中首先被方法中的试剂去除,表现出负的基质效应,因此本标准物质不适合用于去游离甘油法的常规系统。在其他以总甘油为测定对象的系统中大都表现出正的基质效应。因此本标准物质主要适用范围为:总胆固醇、游离胆固醇、高/低密度脂蛋白胆固醇、总甘油、游离甘油和三酰甘油参考方法中的校准物质或正确性质控物质,也可用于具有互通性的常规系统中的校准物或正确性质控物,如大多数胆固醇常规测定系统和个别三酰甘油常规测定系统。

本项目针对胆固醇、甘油这2项重要的常规临床检验指标,采用环糊精水溶液基质,研制了6个浓度水平的标准物质。经研究其均匀性、稳定性良好,定值可靠,可溯源至SI单位。已被国家质量监督检验检疫总局发布为国家一级标准物质(GBW 09823、GBW 09824、GBW 09825、GBW09826、GBW09827和GBW 09828)。

参考文献
[1]
Joint Commission for Traceability in Laboratory Medicine (JCTLM) Database of higher order reference materials, measurement methods/procedures and services[DB/OL]. http://www.bipm.org/jctlm/.
[2]
International Organization for Standardization. ISO Guide 35 Reference materials-General and statistical principles for certification[S].Geneva, Switzerland: ISO, 2006.
[3]
国家标准物质研究中心中华人民共和国国家计量技术规范JJG 1006-1994一级标准物质技术规范[S]. 北京中国计量出版社1994.
[4]
周伟燕张传宝马嵘. 高密度与低密度脂蛋白胆固醇参考物质在4种常规检测系统上的同步稳定性研究[J]. 中华检验医学杂志2014, 37(7): 522-526. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.07.011
[5]
ZhouW, LiH, DongJ, et al. Serum cholesterol measured by isotope dilution liquid chromatography tandem mass spectrometry[J].Clin Chem Lab Med, 2011, 49(4): 669-676. DOI: 10.1515/CCLM.2011.093.
[6]
刘蕾周伟燕孙春华. 同位素稀释液相色谱串联质谱法测定血清总胆固醇[J]. 中华检验医学杂志2007, 30(3): 250-254. DOI: 10.3760/j.issn:1009-9158.2007.03.003.
[7]
周伟燕刘蕾张传宝. 同位素稀释液相色谱串联质谱法测定血清总甘油[J]. 中华检验医学杂志2008, 31(3): 254-257. DOI: 10.3321/j.issn:1009-9158.2008.03.004.
[8]
中国合格评定国家认可委员会. CNAS-GL03能力验证样品的均匀性和稳定性评价指南[S].北京中国合格评定国家认可委员会2006.
[9]
CLSI. EP14-A2 Evaluation of matrix effects; Approved guideline-Second Edition[S]. Wayner PA: CLSI, 2005.
[10]
周伟燕赵海舰张江涛血清总甘油测定基质效应的研究[J]. 中华检验医学杂志2008, 31(5): 568-573. DOI: 10.3321/j.issn:1009-9158.2008.05.024.
[11]
赵海建周伟燕张传宝. 血清总胆固醇测定的基质效应研究[J]. 现代检验医学2009, 24(3): 5-9.
 
 
关键词
主题词
胆固醇
甘油三酯类
环糊精类
溶液
指示剂和试剂
参考标准
串联质谱法